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表达巨细胞病毒抗原的哺乳动物细胞制造技术

2017-08-18 09:44:43 来源:齐鲁在线 编辑:K027_小凯乐
本发明专利技术涉及适合于疫苗用途的巨细胞病毒(CMV)蛋白。本文提供了哺乳动物宿主细胞,特别是CHO细胞,其中编码CMV蛋白gH、gL、pUL128、pUL130、pUL131(或其复合物形成片段)的序列稳定整合至基因组中。

Mammalian cells expressing CMV antigens

The present invention relates to cytomegalovirus (CMV) proteins that are suitable for vaccine use. This article provides mammalian host cells, especially CHO cells, which encode sequences of CMV, gH, gL, pUL128, pUL130, pUL131, or their complex forming fragments and integrate into the genome stably.

1 技术实现步骤摘要

【国外来华专利技术】专利
本专利技术涉及表达适合于疫苗用途的巨细胞病毒(CMV)蛋白的宿主细胞。专利技术背景巨细胞病毒是属于被称作疱疹病毒科或疱疹病毒的病毒科的病毒属。感染人类的物种通常称作人巨细胞病毒(HCMV)或人疱疹病毒-5(HHV-5)。在疱疹病毒科中,HCMV属于乙型疱疹病毒亚科,其还包括来自其它哺乳动物的巨细胞病毒。尽管它们可见于整个身体,但HCMV感染通常与唾液腺相关。HCMV感染了美国50%至80%的成年人(全世界40%),如抗体在大量普通人群中的存在所示。HCMV感染在健康人中通常是不引入注意的,但对于免疫功能低下者(诸如感染HIV的人、器官移植受体或新生婴儿)可以是致命的。HCMV是最频繁地传播至发育中的胎儿的病毒。感染后,HCMV具有在宿主终生在体内维持潜伏的能力,伴随偶尔地由潜伏再活化。鉴于该疾病的严重性和重要性,获得有效的疫苗被认为是公共卫生的顶级优先事项(Sung,H.,等人,(2010)Expertreviewofvaccines9,1303-1314;Schleiss,ExpertOpinTherPat.Apr2010;20(4):597-602)。已对超过20种不同HCMV毒株的基因组测序,包括实验室毒株和临床分离物的那些。例如,已对以下HCMV毒株测序:Towne(GL239909366)、AD169(GI:219879600)、Toledo(GL290564358)和Merlin(GI:155573956)。HCMV毒株AD169、Towne和Merlin可获得自美国典型培养物保藏中心(分别为ATCCVR538、ATCCVR977和A...【详细说明在详细技术资料中】

 

2 技术保护点

重组CHO细胞,其包含:一种或多种编码巨细胞病毒(CMV)五聚体复合物的多核苷酸序列,其中所述五聚体复合物包含:gH或其复合物形成片段、gL或其复合物形成片段、pUL128或其复合物形成片段、pUL130或其复合物形成片段和pUL131或其复合物形成片段,其中所述一种或多种多核苷酸序列整合至所述CHO细胞的基因组DNA中。

3 技术保护范围摘要

【国外来华专利技术】2014.10.31 EP 14191385.51.重组CHO细胞,其包含:一种或多种编码巨细胞病毒(CMV)五聚体复合物的多核苷酸序列,其中所述五聚体复合物包含:gH或其复合物形成片段、gL或其复合物形成片段、pUL128或其复合物形成片段、pUL130或其复合物形成片段和pUL131或其复合物形成片段,其中所述一种或多种多核苷酸序列整合至所述CHO细胞的基因组DNA中。2.权利要求1的CHO细胞,其中所述CHO细胞是CHO-K1细胞、CHO-DUXB11、CHO-DG44细胞或CHO-S细胞。3.权利要求1或2的CHO细胞,其中与对照相比,在所述细胞中C12orf35蛋白的表达水平或活性降低。4.权利要求3的CHO细胞,其中所述C12orf35基因的基因组序列的至少一个拷贝,或所述C12orf35基因的编码序列的至少50%被缺失。5.权利要求4的CHO细胞,其中所述缺失的序列包含CHO细胞的染色体8的端粒区域的一部分。6.权利要求1-5中任一项的CHO细胞,其中与对照相比,在所述细胞中FAM60A蛋白的表达水平或活性降低。7.权利要求6的CHO细胞,其中所述FAM6...

4 专利技术属性

发明(设计)人:A卡菲C齐费里I霍夫曼H劳克斯A利尔雅Y温
申请(专利权)人:葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司
专利类型:发明
专利号:201580059495
国别省市:比利时;BE


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